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Lyme-Borreliose-Test Genauigkeit – Western-Blot

Western Blot Test

Stichprobe von Western-Blot-Test-Ergebnisse

Der Western-Blot verwendet eine recht einfache Technik, die möglichen Antikörpern durch das relative Gewicht ihrer Antigene, So trennen sie heraus für die Analyse. Die Einheiten verwendet, um diese "Banden" zu unterscheiden sind Kilo-Dalton (kDa), eine winzige Gewichtseinheit etwa gleich der Masse eines Protons oder ein Neutron. Gel-Elektrophorese verwendet wird, um native oder denaturierte Proteine ​​gemäß der Länge des Polypeptids oder der Struktur des Proteins in der Probe zu trennen. Diese Proteine ​​werden dann auf einer Membran, wo spezifische Antikörper an das Zielprotein verwendet werden, um sie zu erkennen übertragen.

Ergebnisse einer Western-Blot-Test für Lyme-Borreliose werden in Bands wie 22kDa getrennt, 41kDa, 93kDa, usw., mit einigen repräsentieren signifikante Marker der Lyme-Borreliose-Antikörper. Die 31kDa Bande auf dem Western-Blot zeigt die Anwesenheit eines Antikörpers gegen OspA und ist spezifisch für nur ein paar Stämme Borrelien (einschließlich des in die verwendet LYMErix Impfstoff). Weitere signifikante Banden sind 34kDa (OspB) und 23kDa (OspC).


Lyme-Borreliose-Test Bands Inmitten Confusion Überarbeitet

Das Potenzial für Verwirrung und Unstimmigkeiten in der Berichterstattung und Analyse der Western-Blot-Test, Angesichts der Vielzahl der beteiligten Bands, Die CDC und der Zusammenschluss der staatlichen und territorialen Public Health Laboratory Directors überarbeitete Leitlinien in 1994. Die neuen Richtlinien nicht mehr berücksichtigt Bands 22, 23, 25, 31, und 34kDa als spezifisch und signifikant für Borrelia burgdorferi Bakterien Belichtung und entfernt diese Bands aus sogar als meldepflichtig, sehr zum Leidwesen von einer Reihe von Lyme-Borreliose-Forscher und-anwälte an der Zeit,. Es wurde kein Grund für diese Aktion und einer zuvor vernünftigen Test zum Nachweis von Lyme-Krankheit gegeben wurde, jetzt als ziemlich schlecht von vielen Klinikern. Eine Reihe von Labors auch gestoppt Berichterstattung, die Banden wurden markiert und fing lediglich um eine positive oder negative Interpretation zusammen mit den neuen Richtlinien geben.

Forschung durchgeführt von Fawcett, et al, (1995), hervorgehoben, das Problem mit den neuen Richtlinien über bestätigte Fälle von Lyme-Borreliose, die Genauigkeit der alten Western-Blot zu bewerten und die aktualisierte Version. Die neuen Leitlinien enthalten zehn spezifische Banden als meldepflichtig aus dem ursprünglichen 25. Für eine Western-Blot-IgG wurde ein positives Ergebnis als mindestens fünf der folgenden Banden bestimmt: 18, 21,28, 30, 39, 41,,45, 58, 66 und 93kDa. Zwei oder mehr der Bänder 23, 39, und 41, wurden für eine positive IgM Western Blot benötigt.

Neue Bands nicht spezifisch genug für die Lyme-Test

Die Forscher untersuchen die neuen Richtlinien waren beunruhigt, dass einige der Bands, die bisher als spezifisch und nicht mehr signifikant waren anwesend, nämlich 22, 23, 25, 31, und 34, die enthalten OspA, OspB , , OspB, und OspC. Sechsundsechzig symptomatisch pädiatrischen Patienten mit einer Vorgeschichte von Zeckenbiss, und Erythema migrans positiv getestet nach den alten Richtlinien, während nur 20 wurden als positiv auf den neuen Kriterien. Dieses Potenzial Niveau der Ungenauigkeit würde dann zu erheblichen underdiagnosis und Denial-of-führen Behandlung von Lyme-Borreliose für viele Patienten.


Der Mangel an Veränderung in den CDC-Richtlinien seit 1995 ist überraschend in Anbetracht der Höhe der Forschung hinaus in Lyme-Krankheit und ihrer Interaktion mit dem Immunsystem durchgeführt. Die Leitlinien sind immer noch als unvollständig Während von einigen sogenannten "Lyme-literate Ärzte ' (LLMDs) keine weiteren Vorschläge der wesentliche Revision wurden von der CDC angenommen. Support für die aktuelle Zwei-Klassen-Testmethode wurde allerdings kritisiert,, mit einem Papier von Steere, et al, (2008), behauptet 100% Empfindlichkeit trotz eines positiven Tests, die Teil der Kriterien für eine Diagnose (i.e. Zirkelschluss wurde eingesetzt, ob unaufrichtig oder durch Versehen). Steere selbst schlägt, unter anderem, , dass eine alternative C6 Peptid-ELISA Verdienste Untersuchung mehr als eine mögliche Ersetzung der gegenwärtigen Zwei-Klassen-Typen Lyme-Borreliose-Tests.

Europäische Western-Blot-Test-Genauigkeit

Die aktuelle Hinweise zur Verwendung von Western-Blot-Tests für Lyme-Borreliose in Europa wird von europäischen konzertierten Aktion auf Lyme-Borreliose mit Auslegung von Kriterien formuliert Engstrom, et al, (1995) und Dressler, et al, (1993), für IgM-und IgG bzw.. Der Grund dafür, dass die Kriterien aus den USA unterscheiden sich darin, dass verschiedene Stämme von Borrelien in Europa präsent sind. Die EUCALB Führung ferner, dass die Verwendung dieser Begriffe Führer unterschiedlich ausgelegt werden abhängig von der Belastung oder Arten als Antigen verwendet wird. Acht Bands wurden als diskriminierend für Lyme-Borreliose-Erkennung identifiziert, obwohl diese an Bedeutung variiert.

Engströms Führung deutet auf eine positive IgM-Western-Blot, wenn zwei von drei Proteinen (24, 39, und 41kDa) werden in der Probe erkannt. Dressler empfiehlt Diskriminierung auf der Grundlage von mindestens fünf der zehn häufigsten IgG-Banden im frühen Lyme-Borreliose: 18, 21, 28, 30, 39, 41, 45, 58, 66, und 93kDa. Diese IgG-Blot wurde gezeigt, dass eine Spezifität von über 95% und eine Sensitivität von 83% Nach den ersten Wochen nach der Infektion. Die Kriterien für die Auslegung und Reporting-Western-Blot-Ergebnisse in Europa hat sich seit dem Anfang bis Mitte der 1990er Jahre geändert, ebenso wie die nordamerikanischen Richtlinien der CDC veröffentlicht wurden nicht in den letzten Jahren verändert.

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Referenzen

Dressler F, Whalen JA, Reinhardt BN, Steere AC. Western-Blot in der Serodiagnostik der Lyme-Borreliose. J Infect Dis. 1993 Februar;167(2):392-400.

Engstrom SM, Shoop E, Johnson RC. Immunoblot-Kriterien für die Auslegung Serodiagnostik der frühen Lyme-Borreliose. J Clin Microbiol. 1995 Februar;33(2):419-27.

Fawcett, P., et al,. Western Blot und falsche Negative bei Kindern: Rheumatologie Symposien Zusammenfassung #1254, 1995.

Mavin S, McDonagh S, Evans R, Milner RM, Chatterton JM, Ho-Yen DO. Interpretation Kriterien in Western-Blot-Diagnose der Lyme-Borreliose. Br J Biomed Sci. 2011;68(1):5-10.

Steere AC, McHugh G, Damle N, Sikand VK. Prospektive Studie über serologische Tests für Lyme-Borreliose. Clin Infect Dis. 2008 Juli 15;47(2):188-95.

Hauser U, Lehner G, Wilske B. Gültigkeit der Interpretation Kriterien für die standardisierte Western Blots (Immunoblots) für die Serodiagnostik der Lyme-Borreliose auf Seren, die in ganz Europa basiert. J Clin Microbiol. 1999 Juli;37(7):2241-7.