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ELISA Prueba para la enfermedad de Lyme

Lyme Disease TestEl más común La enfermedad de Lyme, la prueba es el ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA). Esta prueba ha estado disponible por Borrelia burgdorferi desde 1984 y la mayoría de las pruebas de ELISA comerciales utilizan un sonicado de células enteras de la bacteria. La prueba ELISA detecta anticuerpos contra la Borrelia burgdorferi las bacterias que causan la enfermedad de Lyme y los resultados se reportan generalmente en los títulos que indica el nivel de anticuerpos en la muestra. La prueba de ELISA se ceba, utilizando cepas de laboratorio de Borrelia burgdorferi, rompiendo los antígenos en fragmentos e incrustación de ellos en el lado del recipiente de reactivo (tal como un tubo de ensayo). El suero del paciente (sangre) o el líquido cefalorraquídeo (CSF) se añaden y cualquier anticuerpos contenidos en la muestra que son específicas de la cepa de prueba se unirán a los antígenos. Este enlace se indica por enzimas especiales relacionadas con los antígenos que cambian de color en el caso de una reacción antígeno-anticuerpo. Un alto título, de, digamos, 1:256, significa que la muestra requiere la dilución considerable, en este caso una parte de suero 256 partes de agua, antes de la reacción ya no se produce ningún cambio de color y es detectable.

Sensibilidad de ELISA Pruebas

La prueba de ELISA se considera que tiene el más alto sensibilidad en la detección de la enfermedad de Lyme pero una especificidad bastante baja, que es la razón de que las directrices de organismos como los CDC aconsejan las pruebas de seguimiento con un Western blot cuando el resultado de la prueba ELISA ser positivo o indeterminado. Cuando una prueba de ELISA no está disponible, un prueba de inmunofluorescencia se puede realizar pero esto se considera menos fiable que la prueba de ELISA por el CDC.

La prueba ELISA original involucrado en las pruebas de dos niveles determina los niveles de anticuerpos en suero de inmunoglobulina M e inmunoglobulina G. Estos anticuerpos surgen en respuesta a la infección con el IgM generalmente alcanzando niveles detectables dentro de dos a cuatro semanas y los anticuerpos de IgG capaz de ser detectada entre cuatro y seis semanas con un pico a las ocho semanas. El momento de la prueba ELISA para IgG e IgM es, por lo tanto, muy importante con el fin de garantizar que un relativamente temprana etapa de la infección o infección etapa tardía, donde los niveles de IgM puede haber disipado, no es la causa de un resultado negativo.

Los avances en la prueba ELISA Enfermedad de Lyme

Una prueba de ELISA más reciente en la enfermedad de Lyme tomar la forma de la C6-péptido ELISA que detecta anticuerpos IgG contra la proteína principal variable de tipo de secuencia expresada (Afectado) invariate sexta región (C6) péptido de la bacteria Borrelia. Esta prueba parece ser más sensible y específica que las pruebas ELISA anterior particularmente en muestras de líquido cefalorraquídeo. Pruebas de ELISA de nueva generación tienen por objeto ser más sensibles a los antígenos únicos y específicos Borrelia burgdorferi tales como OspA (31kDa), OspB (34kDa), OspC (23025kDa), 39kDa, y 93kDa.


Problemas con la prueba de ELISA para la enfermedad de Lyme

Además de las consideraciones de tiempo necesarios para las pruebas de ELISA, también es importante que la prueba se ceba con el apropiado cepas de bacterias Borrelia para cada caso. Con la normalización de más pruebas comerciales este rara vez se hace lo que significa que falsos negativos son mucho más probable que ocurra que con las pruebas de la medida del paciente-. Bacterias Borrelia son muy heterogéneos con diferencias significativas en las proteínas de superficie que ocurren durante la división celular entre las bacterias. Esta es una técnica de supervivencia empleada por las bacterias para evitar detección por nuestro sistema inmunológico y, como tal, los anticuerpos producidos en respuesta a una cepa de Borrelia burgdorferi sensu lato pueden no corresponder a las proteínas de la superficie exterior de una cepa diferente.

Enfermedad de Lyme en Europa – Tiempos de prueba

Las diferencias en los PSO han encontrado en bacterias de la enfermedad de Lyme plantea problemas para los pacientes en Europa, donde varias cepas de bacterias Borrelia se sabe que causan la enfermedad de Lyme, incluyendo B. afzelii, y B. garinii entre otros. Todas estas cepas requieren la inclusión en la prueba de ELISA en Europa haciendo una sola prueba contra un solo antígeno altamente cuestionable. En los EE.UU. y Canadá se plantea un problema similar en que las cepas de laboratorio utilizados en la prueba ELISA pueden tener diferencias polimórficas significativas a los salvajes cepas de Borrelia burgdorferi, dando así un falso negativo en la presencia de la enfermedad de Lyme. Se requiere más investigación sobre las cepas presentes en el entorno actual para asegurar que todas las bacterias Borrelia capaces de inducir la enfermedad de Lyme se identifican y son por lo tanto capaces de incorporarse a las pruebas de antígeno.

Problemas con la Experimentación con Animales

La mayoría de los Enfermedad de Lyme centros de pruebas en laboratorios de Estados Unidos se basan en una cepa de la bacteria Borrelia conocido como B-31. Esta cepa se inyecta en ratones en el laboratorio con el fin de extraer entonces un anticuerpo monoclonal para cada antígeno que se puede utilizar para determinar la exactitud de la prueba ELISA. Un problema potencial adicional puede ser planteada por las ligeras diferencias en las respuestas del sistema inmune de los ratones y los seres humanos, por lo que es difícil evaluar la exactitud del método de ensayo. Un anticuerpo monoclonal de ratón tiene una afinidad diferente a la cepa B-31, y cepas de Borrelia presumiblemente otras, que un anticuerpo de suero humano por lo que el Colegio Americano de Patólogos llevó a cabo un estudio para determinar la exactitud de las pruebas de ELISA usando suero humano. Los resultados de su estudio de corte laboratorio encontraron una precisión global de sólo 45% para la 516 instalaciones de ensayo investigó (Bakken, et al, 1997).

Es una baja Lyme Titer realidad la prueba del trabajo duro del sistema inmunológico?

Aun suponiendo que no existe ningún problema en el uso de animales en Investigación de la enfermedad de Lyme como este, el aumento de la especificidad de la prueba ELISA puede significar que falla una prueba para identificar anticuerpos para cepas similares al que se está probado, pero no exactamente lo mismo. La prueba de ELISA también sólo es capaz de detectar anticuerpos libres, lo que significa que las presentes en la muestra que ya han complejado con un antígeno presente en el paciente no se mostrará en las pruebas, lo que conduce a un falso negativo. Algo contra-intuitiva, aquellos pacientes con altos títulos en una prueba ELISA a menudo se considera que tiene una infección grave mientras que aquellos con bajos niveles de anticuerpos pueden clasificarse como libre de la enfermedad. En este último caso, sin embargo, puede ser que los altos niveles de antígeno han sido complejado con éxito por anticuerpos dejando pocos anticuerpos libres para reaccionar con una muestra de prueba. Aunque propios anticuerpos del paciente pueden entonces erradicar con éxito la infección, esto no significa que su infección no es grave, pero es posible que, debido a la negativa de prueba ELISA, simplemente ser ignorado. Un título elevado puede indicar en realidad una inmunidad natural más fuerte en lugar de la infección extrema.

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