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Test ELISA pour la maladie de Lyme

Lyme Disease TestLe plus commun Test de la maladie de Lyme le dosage immuno-enzymatique (ELISA). Ce test a été disponible pour Borrelia burgdorferi depuis 1984 et la plupart des tests ELISA commerciaux utilisent un ensemble de traitement par ultrasons de cellules des bactéries. Le test ELISA détecte les anticorps aux Borrelia burgdorferi les bactéries qui causent la maladie de Lyme et les résultats sont généralement rapportées en indiquant le niveau des titres d'anticorps dans l'échantillon. Le test ELISA est amorcée, en utilisant des souches de laboratoire de Borrelia burgdorferi, en décomposant les antigènes en fragments et en les incluant dans le côté de la cuve de réactif (tel qu'un tube à essai). Le sérum du malade (sang) ou le liquide céphalorachidien (CSF) est ajouté et tous les anticorps contenus dans l'échantillon qui sont spécifiques à la souche d'essai vont se lier aux antigènes. Cette liaison est indiquée par enzymes spéciales liées à des antigènes qui changent de couleur en cas d'une réaction anticorps-antigène. Une haute titre, de dire 1:256, signifie que l'échantillon doit être dilué considérable, dans ce cas, une partie du sérum à 256 parties d'eau, avant la réaction ne se produit pas de changement de couleur et est détectable.

Sensibilité de l'ELISA Test

Le test ELISA est considéré comme ayant la plus haute sensibilité dans la détection de la maladie de Lyme mais une spécificité assez faible, qui est la raison pour laquelle les lignes directrices des organismes tels que le CDC conseille les tests de suivi avec un Western blot si le résultat du test ELISA être positive ou indéterminée. Lorsqu'un test ELISA ne est pas disponible, un immunofluorescence peut être effectuée, mais cela est considéré comme moins fiable que le test ELISA par la CDC.

Le test ELISA d'origine impliqué dans les tests à deux niveaux détermine les niveaux d'immunoglobuline M et immunoglobuline G anticorps sériques. Ces anticorps se produisent en réponse à l'infection par le IgM atteindre des niveaux détectables habituellement en deux à quatre semaines, et les anticorps IgG pouvant être détectée entre quatre et six semaines avec un pic à huit semaines. Le calendrier des tests ELISA pour IgG et IgM est, donc, très important afin de veiller à ce qu'un relativement l'infection à un stade précoce ou infection tardive, où les niveaux d'IgM peut-être dissipée, ne est pas la cause d'un résultat négatif.

Les progrès sur les tests ELISA maladie de Lyme

Un test ELISA plus récent pour la maladie de Lyme prendre la forme de l' C6-peptide ELISA qui détecte les anticorps IgG à la grande variable de type protéine de séquence exprimée (VIsE) sixième région invariate (C6) peptide de la bactérie Borrelia. Ce test semble être plus sensible et spécifique que la précédente tests ELISA en particulier dans les échantillons de liquide céphalorachidien. Les tests ELISA de nouvelle génération visent à être plus sensibles aux antigènes Borrelia burgdorferi uniques et spécifiques tels que OspA (31kDa), OspB (34kDa), OspC (23025kDa), 39kDa, et 93kDa.


Problèmes avec le test ELISA pour la maladie de Lyme

En plus des considérations de temps nécessaires pour les tests ELISA, il est également important que le test est amorcée avec le cas échéant souches de bactéries Borrelia pour chaque cas. Avec la normalisation de la plupart des tests commerciaux cela se fait rarement ce qui signifie que de faux négatifs sont beaucoup plus susceptibles de se produire qu'avec les tests du patient sur mesure. bactéries Borrelia sont très hétérogènes avec des différences significatives dans les protéines de surface qui se produisent pendant la division cellulaire chez les bactéries. Ce est une technique de survie utilisé par les bactéries pour éviter détection par le système immunitaire et, en tant que tel, les anticorps produits en réponse à une souche de Borrelia burgdorferi sensu lato peuvent ne pas correspondre à des protéines de surface externe d'une souche différente.

La maladie de Lyme en Europe – Temps d'essai

Les différences dans les OSP trouvés sur les bactéries maladie de Lyme pose des problèmes pour les patients en Europe, où plusieurs souches de bactéries Borrelia sont connus pour causer la maladie de Lyme, y compris B. afzelii, et B. garinii entre autres. Toutes ces souches exigent l'inclusion dans les tests ELISA en Europe faire un seul essai contre un seul antigène très discutable. Aux États-Unis et au Canada un problème similaire se pose en ce que les souches de laboratoire utilisées dans le test ELISA peuvent avoir des différences importantes polymorphes aux sauvages souches de Borrelia burgdorferi, donnant ainsi un faux négatif en présence de la maladie de Lyme. D'autres recherches sur les souches présentes dans l'environnement actuel est nécessaire pour se assurer que toutes les bactéries Borrelia capables d'induire la maladie de Lyme sont identifiés et sont ainsi capables d'être incorporés dans les tests de l'antigène.

Problèmes avec les tests sur les animaux

La majorité des Centres lyme maladie de test dans des laboratoires américains se appuient sur une souche de bactéries Borrelia appelé B-31. Cette souche est injecté à des souris dans le laboratoire afin d'en extraire ensuite un anticorps monoclonal dirigé contre chaque antigène qui peut être utilisé pour déterminer la précision du test ELISA. Un autre problème potentiel peut être posée par les légèrement différentes réponses du système immunitaire des souris et les humains, ce qui rend difficile l'évaluation de la précision de la méthode d'essai. Un anticorps monoclonal de souris a une affinité différente de la souche B-31, et sans doute d'autres souches de Borrelia, qu'un anticorps de sérum humain qui est pourquoi l'American College of Pathologists a réalisé une étude afin de déterminer l'exactitude des tests ELISA utilisant des sérums humains. Les résultats de leur étude croisée laboratoire trouvé une précision globale de tout 45% pour l' 516 installations d'essai enquête (Bakken, et al, 1997).

Est un faible Lyme Titer fait preuve d'un travail acharné du système immunitaire?

Même en supposant qu'il n'existe aucun problème dans l'utilisation des animaux dans Recherche sur les maladies de Lyme comme celle-ci, la spécificité accrue du test ELISA peut signifier qu'un test ne parvient pas à identifier des anticorps à des souches semblables à celle qui est testée, mais pas exactement les mêmes. Le test ELISA est également à seulement capable de détecter des anticorps libres, ce qui signifie que ceux qui sont présents dans l'échantillon qui ont déjà complexé avec un antigène présent dans le patient ne se présentera pas à l'essai, conduisant ainsi à un faux-négatif. Un peu contre-intuitive, les patients ayant des titres élevés dans un test ELISA sont souvent considérés comme ayant une infection grave tandis que ceux avec de faibles niveaux d'anticorps peuvent être classés comme indemne de la maladie. Dans ce dernier cas cependant, il se peut que des niveaux élevés d'antigène ont été complexés avec succès par des anticorps laissant peu d'anticorps libres pour réagir avec un échantillon d'essai. Bien que les anticorps propres du patient peuvent alors éradiquer avec succès l'infection cela ne signifie pas que leur infection ne est pas grave, mais il peut, en raison d'un test négatif ELISA, tout simplement être ignoré. Un titre élevé peut effectivement indiquer une immunité naturelle plus forte plutôt que l'infection extrême.

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