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Précision de Lyme Disease test – Western Blot

Western Blot Test

Exemple de l'Ouest Résultats des tests Blot

Le Western blot utilise une technique assez simple qui trie anticorps par le poids relatif de leurs antigènes, les séparant ainsi pour analyse. Les unités utilisées pour différencier ces des bandes des daltons sont kilo (kDa), une unité de petit poids environ égale à la masse d'un proton ou un neutron. Électrophorèse sur gel est utilisé pour séparer les protéines natives ou dénaturé fonction de la longueur du polypeptide ou de la structure de la protéine dans l'échantillon. Ces protéines sont ensuite transférées sur une membrane où les anticorps spécifiques à la protéine cible sont utilisés pour les détecter.

Les résultats d'une Test Western blot pour la maladie de Lyme sont séparés en groupes tels que 22 kDa, 41kDa, 93kDa, et ainsi de suite, avec quelques marqueurs représentant significatifs d'anticorps maladie de Lyme. La bande de la 31kDa Western blot indique la présence d'un anticorps dirigé contre l'OspA et est spécifique à seulement quelques souches de Bactéries Borrelia (y compris celle utilisée dans le Lymerix vaccin). D'autres bandes importantes sont 34kDa (OspB) et 23kDa (OspC).


Bandes de Lyme Disease essai révisée un climat de confusion

Le risque de confusion et d'incohérence dans les rapports et l'analyse de l'essai Western blot, étant donné la multitude de bandes impliquées, la CDC et l'Association des États et des Territoires publics directeurs de laboratoire de santé dans les lignes directrices révisées 1994. Les nouvelles lignes directrices ne sont plus considérés comme des bandes 22, 23, 25, 31, et 34kDa pour être précis et significatif pour les bactéries Borrelia burgdorferi exposition et retiré ces bandes de même être à déclaration obligatoire, au grand dam d'un certain nombre de chercheurs et les défenseurs de la maladie de Lyme au moment. Aucune raison n'a été donnée pour cette action et un test préalable raisonnable pour détecter la maladie de Lyme est maintenant considérée comme assez faible par de nombreux cliniciens. Un certain nombre de laboratoires ont également cessé de déclarer que les bandes ont été mises en évidence et a commencé simplement à donner une interprétation positive ou négative avec les nouvelles lignes directrices.

Les recherches menées par Fawcett, et al (1995), mis en évidence le problème avec les nouvelles lignes directrices à l'aide de cas confirmés de la maladie de Lyme pour évaluer l'exactitude de la tache ancienne de l'Ouest et la version mise à jour. Les nouvelles lignes directrices comprenait dix bandes spécifiques comme les déclaration de l'origine de vingt à cinq. Pour une tache IgG Ouest un résultat positif a été déterminée comme étant au moins cinq des bandes suivantes: 18, 21,28, 30, 39, 41,,45, 58, 66 et 93kDa. Deux ou plusieurs des bandes 23, 39, et 41, ont été nécessaires pour un résultat positif blot IgM Ouest.

Nouvelles bandes pas assez précis pour Lyme test

Les chercheurs qui étudient les nouvelles lignes directrices ont été troublé de constater que plusieurs des groupes précédemment considérés spécifique et significative ne sont plus présentes, à savoir 22, 23, 25, 31, et 34, qui comprenait OspA, OspB , , OspB, et OspC. Soixante-six patients symptomatiques pédiatriques avec une histoire de morsure de tique, et érythème migrant ont été testés positifs dans le cadre des anciennes lignes directrices, tout en tout juste vingt ans ont été jugés positifs sur les nouveaux critères. Ce niveau de potentiel d'inexactitude conduirait alors à sous-diagnostic important et le refus de traitement pour la maladie de Lyme pour de nombreux patients.


L'absence de changement dans les lignes directrices des CDC depuis 1995 est surprenant compte tenu de la quantité de recherches menées sur la maladie de Lyme et de son interaction avec le système immunitaire. Alors que les lignes directrices sont toujours considérées comme incomplètes par certains soi-disant 'Lyme alphabétisés médecins' (LLMDs) pas d'autres suggestions de révision substantielle ont été acceptées par le CDC. Prise en charge de la méthode d'essai à deux niveaux actuel a été critiqué cependant, avec un article de Steere, et al (2008), réclame 100% la sensibilité, malgré un test positif faisant partie des critères pour un diagnostic (i.e. raisonnement circulaire était utilisée, si hypocritement ou par la surveillance). Steere suggère lui-même, , entre autres, qu'une alternative Peptide C6 ELISA mérite d'être étudié davantage comme un remplacement possible des actuels à deux niveaux types de des tests de la maladie de Lyme.

Europe de l'Ouest Précision test Blot

Les directives actuelles concernant l'utilisation du test Western blot pour la maladie de Lyme en Europe est formulée par une action concertée européenne sur la borréliose de Lyme en utilisant des critères d'interprétation de Engstrom, et al (1995) et Dressler, et al (1993), pour IgM et IgG, respectivement. La raison pour laquelle les critères sont différents des États-Unis est que les différentes souches de bactéries Borrelia sont présents en Europe. Le guide indique également que EUCALB l'utilisation de ces critères recommandés est ouvert à l'interprétation en fonction de la souche ou d'une espèce utilisée comme antigène. Huit bandes ont été identifiés comme étant discriminatoire pour la détection la borréliose de Lyme, bien que ceux-ci variaient en importance.

Orientations Engstrom suggère une tache IgM positifs de l'Ouest où deux des trois protéines (24, 39, et 41kDa) sont reconnus dans l'échantillon. Dressler recommande la discrimination sur la base d'au moins cinq des dix bandes IgG les plus courantes dans la maladie de Lyme au début: 18, 21, 28, 30, 39, 41, 45, 58, 66, et 93kDa. Cette tache IgG a été démontré qu'ils ont une spécificité de 95% et une sensibilité de 83% après les premières semaines de l'infection. Les orientations sur l'interprétation et la présentation des résultats du Western blot en Europe n'a pas changé depuis le début des années 1990 à la mi, tout comme les lignes directrices nord-américaines publiées par le CDC n'ont pas changé ces dernières années.

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Références

Dressler F, Whalen JA, BN Reinhardt, Steere AC. Western blot dans le sérodiagnostic de la maladie de Lyme. J Infect Dis. 1993 Février;167(2):392-400.

Engstrom SM, Shoop E, Johnson RC. Critères d'interprétation immunoblot pour le sérodiagnostic de la maladie de Lyme au début. J Clin Microbiol. 1995 Février;33(2):419-27.

Fawcett, P., et al. Western Blot et des faux négatifs chez les enfants: Résumé Symposiums rhumatologie #1254, 1995.

Mavin S, McDonagh S, Evans R, RM Milner, Chatterton JM, Ho-Yen DO. Critères d'interprétation en matière de diagnostic par Western blot de la borréliose de Lyme. Br J Biomed Sci. 2011;68(1):5-10.

Steere AC, McHugh G, Damle N, Sikand VK. Etude prospective des tests sérologiques pour la maladie de Lyme. Clin Infect Dis. 2008 Juillet 15;47(2):188-95.

Hauser U, Lehnert G, Wilske B. Validité des critères d'interprétation pour standardisés Western blot (immunoblots) pour le sérodiagnostic de la borréliose de Lyme basée sur des sérums collectés dans toute l'Europe. J Clin Microbiol. 1999 Juillet;37(7):2241-7.