≡ Меню,,en,нажмите, чтобы вернуться домой,,en,Эл. адрес,,en,Комментарий,,en,Этот сайт создает классическую отзывчивую кожу для,,en,Тезис,,en

Болезнь Лайма проверка точности – Вестерн-блот

Western Blot Test

Пример Западной Результаты тестирования Blot

Вестерн-блот использует довольно простую методику, которая видов антител удельный вес их антигены, отделяя их для анализа. Устройства используются для дифференциации этих "групп" являются кило дальтон (кДа), крошечные единицу веса примерно равна массе одного протона и одного нейтрона. Гель-электрофорез используется для разделения родных или денатурированные белки в зависимости от длины полипептидной или структура белка в образце. Эти белки, которые затем передаются на мембрану, где антитела, специфичные к белку-мишени используются для определения их.

Результаты Вестерн-блот тест на болезнь Лайма разделяются на такие группы, как 22kDa, 41кДа, 93кДа, и так далее, с некоторых представляющих значительный маркеры антител болезнь Лайма. 31kDa группа на западном пятно указывает на наличие антител к OspA и специфичные для нескольких штаммов Borrelia бактерии (в том числе используемые в LYMErix вакцины). Другие важные полосы 34kDa (OspB) и 23kDa (OspC).


Лайма Группы болезни испытаний Пересмотренный Среди Confusion

Во избежание путаницы и непоследовательности в отчетности и анализа иммуноблота, с учетом множества групп участвующих, CDC и Ассоциации государств и территориальных общественных директора лаборатории здравоохранения пересмотренные руководящие принципы в 1994. В новом руководстве не рассматривается полосы 22, 23, 25, 31, и 34kDa быть конкретными и значимыми для Borrelia burgdorferi воздействия бактерий и удалить эти полосы от даже будучи отчетных, к большому огорчению ряда исследователей болезни Лайма и адвокатов в то время. Нет причин была присуждена за эту акцию и ранее разумные тест для выявления болезни Лайма в настоящее время считается довольно бедным многие клиницисты. Число лабораторий, также перестали сообщать, какие группы были выделены и начали просто дать положительное или отрицательное толкование наряду с новыми руководящими принципами.

Исследования, проведенные Фосетт, и др. (1995), внимание на проблему с новыми руководящими принципами с помощью подтвержденных случаев болезни Лайма, чтобы оценить точность старый вестерн-блот и обновленная версия. Новые руководящие принципы были включены десять конкретных групп, как отчетные из оригинального двадцать пять. Для IgG Вестерн-блот положительный результат был определен по крайней мере пять из следующих групп: 18, 21,28, 30, 39, 41,,45, 58, 66 и 93kDa. Два или более полос 23, 39, и 41, были необходимы для положительного IgM Вестерн-блот.

Новые полосы недостаточно конкретны для Лайма испытания

Исследователей, изучающих новые руководящие принципы были обеспокоены, что некоторые группы ранее были рассмотрены конкретные и значительные было больше нет, а именно 22, 23, 25, 31, и 34, который включал OspA, OspB , <диапазон класс = "tr_" ID = "tr_43", OspB, и OspC. Шестьдесят шесть симптоматическое педиатрических пациентов с историей укуса клеща, и мигрирующая эритема положительный результат при старом руководящие принципы в то время всего двадцать были признаны положительными по новым критериям. Это потенциальный уровень погрешности затем привести к значительному гиподиагностики и отказ для лечения болезни Лайма Для многих пациентов.


Отсутствие изменений в руководстве CDC, так как 1995 Удивительно, учитывая количество исследований, проведенных в болезнь Лайма и ее взаимодействия с иммунной системой. В то время как руководящие принципы по-прежнему считаются неполными некоторые так называемые «Лайма грамотных врачей" (LLMDs) никаких дальнейших предложений существенного пересмотра были приняты CDC. Поддержка текущего двухуровневой метод тестирования был подвергнут критике однако, с одной работе Стир, и др. (2008), утверждая, 100% чувствительность, несмотря на положительный тест является частью критериев диагностики (i.e. круговая аргументация был нанят, ли неискренне или по недосмотру). Стир сам предлагает, среди прочего,, что альтернатива C6 пептид ИФА заслуживает более расследования в качестве возможной замены текущего двухуровневого типа Тесты болезнь Лайма.

Западноевропейская Blot проверка точности

В настоящее время руководство по использованию западных тестирования пятно на болезнь Лайма в Европе сформулирована европейскими согласованных действий в области боррелиоз Лайма использованием интерпретации критериев из Engstrom, и др. (1995) и Dressler, и др. (1993), для IgM и IgG соответственно. Причина того, что критерии отличаются от США в том, что различные штаммы бактерий Borrelia присутствуют в Европе. EUCALB руководство также заявляет, что использование этих рекомендуемых критериев открыта для интерпретации в зависимости от штамма или видов, используемых в качестве антигена. Восемь групп были определены в качестве дискриминационных для обнаружения боррелиоза Лайма, хотя эти разнообразны по своей значимости.

Руководство Engstrom предполагает положительный IgM Вестерн-блот, когда два из трех белков (24, 39, и 41kDa) признаются в образце. Дресслер рекомендует дискриминации по признаку, по крайней мере пять из десяти наиболее распространенных групп IgG в начале болезни Лайма: 18, 21, 28, 30, 39, 41, 45, 58, 66, и 93kDa. Это IgG пятно было показано, что специфика 95% и чувствительность 83% После первой недели после заражения. Руководство по интерпретации и представления результатов Западной пятном в Европе не изменилась с начала до середины 1990-х годов, так же как и североамериканские принципы опубликованы Центром контроля заболеваний не изменилась за последние годы.

Продолжить чтение –> Точность ИФА


Ссылки

Дресслер F, Уэлен JA, Рейнхардт BN, Стир AC. Вестерн-блоттинга в серодиагностики болезни Лайма. J заразить Dis. 1993 Февраль;167(2):392-400.

Энгстром SM, Shoop E, Джонсон RC. Вестернблот толкование критериев для серодиагностики раннего болезни Лайма. J Clin Microbiol. 1995 Февраль;33(2):419-27.

Фосетт, П., и др.. Вестерн-блот и ложных негативов у детей: Ревматологии симпозиумов г. #1254, 1995.

Mavin S, МакДонах S, Эванс R, Милнер RM, Чаттертон JM, Хо-Йен ДЕЛАТЬ. Интерпретация критериев в Западной диагноз пятно боррелиоз Лайма. Br J Biomed науки. 2011;68(1):5-10.

Стир AC, Макхью G, Damle N, Sikand В.К.. Перспективные исследования серологических тестов на болезнь Лайма. Clin заразить Dis. 2008 Июль 15;47(2):188-95.

Hauser U, Ленерт G, Вилске B. Срок толкование критериев для стандартизированных западных пятна (иммуноблотах) для серодиагностики боррелиоз Лайма на основе сыворотки собранных по всей Европе. J Clin Microbiol. 1999 Июль;37(7):2241-7.